溶藻弧菌asp基因在大腸桿菌中表達活性研究及條件優化

為進一步研究溶藻弧菌堿性絲氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物學活性和功能,將構建的pET23d-asp在大腸桿菌BL21(DE3)中表達,對表達產物進行純化分析,并優化表達條件.結果表明:在咪唑洗脫緩沖液濃度為100 mmol/L時,表達的可溶性ASP被大量洗脫,純化的ASP相對分子質量約為42 000,具有蛋白活性;在誘導溫度28℃、異丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)濃度1 mmol/L及誘導時間16 h時,表達的活性ASP蛋白最多.

作 者： 蔡雙虎 魯義善 吳灶和 簡紀常 湯菊芬 黃郁蔥 CAI Shuang-hu LU Yi-shan WU Zao-he JIAN Ji-chang TANG Ju-fen HUANG Yu-cong   作者單位： 廣東海洋大學水產學院,廣東省水產經濟動物病原生物學及流行病學重點實驗室暨廣東省水產經濟動物病害控制重點實驗室,廣東,湛江,24025  刊 名： 廣東海洋大學學報  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUANGDONG OCEAN UNIVERSITY  年，卷(期)： 2008 28(3)  分類號： Q933+S917.1  關鍵詞： 溶藻弧菌   asp基因   基因構建   基因表達   表達條件   大腸桿菌  

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