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高純度木瓜蛋白酶的分離純化和性質研究
目的 建立木瓜蛋白酶的分離純化工藝路徑.方法 采用初步采集處理,20%,40%硫酸銨分級沉淀、SP-sephadex C50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶.結果 獲得比活為1 184 U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純化的酶經SDS-PAGE呈單一條帶,高效液相色譜呈單一條帶,純度達到99.31%.該酶耐高溫,最適pH值為7.2,對酪蛋白的動力學常數(Km)為3.5×10-5 mol/L.結論 應用此方法成功純化了高純度的木瓜蛋白酶.
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