親和層析法分離純化豬肺血管緊張素轉換酶

親和膠合成實驗以雙環氧化合物1,4-丁二醇-2-縮水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)為活化體及連接臂,在硼氫化鈉(NaBH)存在的堿性條件下,將載體Sepharose CL―4B與雷諾普利(lisinopril)共價連接在一起,成功合成親和層析膠,并利用親和層析膠對豬肺血管緊張素轉換酶(angiotensin converting enzyme, ACE)進行分離提純.豬肺組織勻漿經1.6～2.6 mol/L硫酸銨分級沉淀、透析平衡、親和柱分離等步驟,從200 g豬肺中提純得到0.79 mg ACE蛋白,酶活力回收11.9%,比活力38.8 U/mg.與層析前的酶液比較,親和層析一步提純可達264倍;與肺勻漿液比較提純達808倍.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳可見,提純的豬肺ACE為一條帶,分子質量約為180 ku.

作 者： 劉宏 陳蘭英 LIU Hong CHEN Lan-Ying   作者單位： 劉宏,LIU Hong(中國醫學科學院心血管病研究所,北京,100037)

陳蘭英,CHEN Lan-Ying(中國協和醫科大學阜外心血管病醫院,北京,100037) 

刊 名： 生物化學與生物物理進展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(5)  分類號： Q503  關鍵詞： 親和層析膠制備   分離純化   血管緊張素轉換酶  

【親和層析法分離純化豬肺血管緊張素轉換酶】相關文章：

酶法制備牦牛乳酪蛋白源血管緊張素轉換酶抑制肽04-27

內切β-葡聚糖苷酶的分離純化及酶學性質04-26

家蠅蛹中多酚氧化酶的分離純化及抑菌活性的研究04-27

具幾丁質酶抑制活性的中性蛋白酶的篩選與純化04-26

人源血管內皮生長因子突變體的克隆、分離純化及活性研究04-26

抗體分離純化技術的研究進展04-27

木聚糖酶的分離純化及性質研究04-26

一種蚯蚓脫氧核糖核酸酶分離純化和性質研究04-27

紫球藻的培養及其硫酸多糖的分離純化04-26

大孔樹脂分離純化葛根總黃酮工藝研究04-27